西北农林科技大学等培育出多基因编辑克隆猪 技术达到世界先进水平

近日，西北农林科技大学动物医学院教授华进联团队和云南农业大学教授魏红江团队合作，采用高效培育多基因编辑猪的sgRNA表达方案，利用三头代孕母猪产下两头双基因编辑仔猪。这是西北地区首次成功获得多基因编辑克隆猪，标志着该地区生猪产业基因编辑生物育种技术达到世界先进水平。相关成果论文在线发表于《动物学研究》。

过去几十年，猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)给全球养猪业造成了重大经济损失。鉴于猪CD163基因所编码的蛋白是PRRSV感染所必需的受体，敲除CD163基因可以培育出对PRRSV感染具有强抵抗能力的新品系。此外，通过基因编辑敲除猪肌肉抑制因子MSTN基因，获得的猪后代瘦肉率更高。因此，对猪多个基因同时编辑并最终培育出抗病高产新品种，在未来畜牧生产领域具有广阔的应用前景。

该研究应用3种策略开展猪的多基因编辑，包括共转染携带不同sgRNA的质粒、转染单个含有串联sgRNA表达盒的质粒，以及转染含有多顺反子sgRNA载体的策略。团队构建了携带3种靶向MSTN和CD163的sgRNA表达装置的载体系统，并量化了其在猪胎儿成纤维细胞中的编辑效率。结果表明，串联sgRNA表达盒的策略可以高效实现猪的多基因改良。

团队将CD163和MSTN基因同时编辑的猪胎儿成纤维细胞进行体细胞核移植试验，利用三头代孕母猪最终产下两头双基因编辑仔猪。全基因组测序结果证实，两头基因编辑猪均未出现预期之外的基因组改变。

相关领域专家认为，该研究为猪的多基因改良提供了一种经济高效的技术体系，培育的CD163和MSTN双基因编辑猪也为后续培育抗猪繁殖与呼吸障碍综合征种猪及高瘦肉率种猪提供了优秀种质材料。(李晓春 张行勇)